木质素的测定常用的测定方法及注意事项

　　木质素的测定是植物化学分析和木质纤维素材料研究中的重要环节。以下为几种常用的测定方法及注意事项：

　　1. Klason法(酸水解法)

　　原理：利用浓硫酸水解样品中的纤维素和半纤维素，剩余残渣(酸不溶木质素)通过干燥称重定量。

　　步骤：

　　样品粉碎至40-60目，干燥后称重。

　　用72%硫酸在30℃下水解1小时，稀释至3%硫酸后高温回流4小时。

　　过滤残渣，干燥称重，计算酸不溶木质素含量。

　　酸溶木质素可通过紫外分光光度法(205-280 nm)测定。

　　特点：经典方法，但耗时较长，需结合紫外法补充酸溶部分。

　　2. 乙酰溴法

　　原理：乙酰溴与木质素发生乙酰化反应，生成可溶性衍生物，通过紫外吸收(280 nm)定量。

　　步骤：

　　样品用乙酰溴-醋酸混合液在70℃下处理30分钟。

　　加入NaOH终止反应，离心后测上清液吸光度。

　　用标准木质素(如松木木质素)绘制标准曲线。

　　特点：快速灵敏，适用于可溶性木质素，需注意不同植物来源的吸光系数差异。

　　3. 紫外分光光度法

　　原理：木质素在紫外区(280 nm附近)有强吸收峰，通过吸光度定量。

　　步骤：

　　样品溶解于离子液体或有机溶剂(如二氧六环)。

　　测定280 nm处吸光度，根据标准曲线计算含量。

　　特点：快速简便，需校准不同来源木质素的消光系数(如针叶木约20 L/g·cm，阔叶木约15 L/g·cm)。

　　4. 红外光谱法(FTIR)

　　原理：利用木质素特征吸收峰(如1510 cm⁻¹芳香环振动)进行定性或半定量分析。

　　步骤：

　　样品与KBr压片或直接测定固体。

　　通过特征峰强度结合PLS等模型定量。

　　特点：无需化学处理，适合快速筛查，但需建立校正模型。

　　5. 核磁共振法(NMR)

　　原理：通过¹³C NMR或二维HSQC分析木质素结构及含量。

　　步骤：

　　样品溶解于氘代溶剂(如DMSO-d6)。

　　测定NMR谱图，积分特征信号峰(如甲氧基峰)。

　　特点：提供结构信息，但设备昂贵、操作复杂。

　　其他方法

　　硫解法：分析木质素单体组成(如紫丁香基、愈创木基)。

　　近红外光谱(NIR)：结合化学计量学模型快速预测含量。

　　重量法：通过氧化剂(如高锰酸钾)处理，测定氧化后残渣。

　　注意事项

　　样品预处理：需充分干燥、粉碎均匀，避免水分和灰分干扰。

　　方法选择：

　　常规定量：Klason法或乙酰溴法。

　　结构分析：NMR或FTIR。

　　快速检测：NIR或紫外法。

　　标准物质：尽量使用与待测样品同源的木质素标准品。

　　干扰因素：酚类化合物、蛋白质可能影响紫外法结果。

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