茶叶中茶多酚(Tea Polyphenols)和儿茶素类(Catechins)是其主要的活性成分,具有抗氧化、抗炎等多种生理功能。准确测定其含量对茶叶品质评价、产品研发及质量控制至关重要。
茶多酚总量的检测方法
1. 酒石酸亚铁比色法(国标法)
标准依据:中国国家标准《GB/T 8313-2018 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》
原理:
茶多酚与酒石酸亚铁在pH ≈ 7.5 的缓冲体系中形成紫蓝色络合物,在 540 nm 处有最大吸收,吸光度与茶多酚浓度成正比。
步骤简述:
茶叶样品经沸水或70%甲醇提取;
定容、过滤得待测液;
取滤液加入酒石酸亚铁试剂和pH 7.5磷酸盐缓冲液;
静置10分钟后,于540 nm测吸光度;
以没食子酸(Gallic acid)为标准品绘制标准曲线,计算茶多酚含量(以没食子酸当量计)。
优点:操作简便、成本低、适合大批量初筛。
局限性:特异性不高,其他酚类物质可能干扰。
注:旧版标准(如GB/T 8313-2002)曾用“以儿茶素计”,新版已统一为“以没食子酸计”。
2. 福林-酚法(Folin-Ciocalteu 法)
原理:
茶多酚还原磷钨酸-磷钼酸复合物(Folin试剂),生成蓝色化合物,在 765 nm 处测定吸光度。
特点:
灵敏度高;
广泛用于植物多酚总量测定;
同样以没食子酸为标准品;
易受糖类、抗坏血酸等还原性物质干扰。
儿茶素类单体的检测方法
儿茶素主要包括:
表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)
表没食子儿茶素(EGC)
表儿茶素没食子酸酯(ECG)
表儿茶素(EC)等
高效液相色谱法(HPLC)——主流标准方法
标准依据:GB/T 8313-2018 中第二法(HPLC法)
原理:
利用反相色谱柱(如C18)分离各儿茶素组分,通过紫外检测器(通常 280 nm)定量。
典型条件:
色谱柱:C18(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)
流动相:A = 水 + 0.1% 甲酸(或磷酸),B = 乙腈(或甲醇),梯度洗脱
流速:1.0 mL/min
柱温:30–40°C
进样量:10–20 μL
前处理:
样品用70%甲醇超声提取30分钟;
冷却、定容、0.22/0.45 μm滤膜过滤;
定量方式:外标法,使用各儿茶素标准品分别绘制标准曲线。
优点:可同时测定多种儿茶素单体,结果准确、重复性好。
缺点:需昂贵仪器,标准品成本高。
来源:网络
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