郑州土壤检测机构：土壤微生物活性测定方法

　　土壤微生物活性(Soil Microbial Activity)是指土壤中微生物进行代谢、生长和繁殖等生命活动的能力，是评价土壤健康、肥力和生态系统功能的重要指标。它反映了土壤中养分循环(如碳、氮、磷的转化)的速率和效率。

　　一、常用测定方法

　　根据检测原理不同，可分为以下几类：

　　1. 基础呼吸法(Basal Respiration)

　　原理：测定土壤微生物在自然状态下氧化有机物释放 CO₂ 的速率。

　　方法：

　　将新鲜土壤置于密闭容器中;

　　定期用 NaOH 或碱石灰吸收 CO₂，再用酸滴定剩余碱量;

　　或使用红外 CO₂ 分析仪、气相色谱直接测定 CO₂ 浓度。

　　优点：操作简单，反映整体代谢活性。

　　局限：受温度、湿度、底物限制影响大。

　　2. 底物诱导呼吸法(Substrate-Induced Respiration, SIR)

　　原理：向土壤中加入易利用碳源(如葡萄糖)，刺激微生物快速呼吸，通过z大呼吸速率估算微生物生物量及活性。

　　常用于：结合 MBC(微生物量碳)计算。

　　3. 酶活性测定法

　　特定水解酶或氧化还原酶的活性可作为微生物功能的“窗口”：

　　FDA 法 是常用的总微生物活性快速评估方法。

　　4. 脱氢酶活性(Dehydrogenase Activity, DHA)

　　原理：脱氢酶存在于所有活细胞中，催化氢转移反应，其活性直接反映微生物代谢活力。

　　常用电子受体：2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)，被还原为红色不溶性三苯基甲臜(TPF)。

　　测定：用甲醇提取 TPF，比色法测定(485 nm)。

　　优点：不受土壤灭菌后残留酶干扰(因脱氢酶仅存在于活细胞)。

　　5. Biolog 微孔板法(Community-Level Physiological Profiling, CLPP)

　　原理：利用 Biolog EcoPlates™ 含31种不同碳源，通过微生物利用碳源还原染料(紫色)的程度，评估群落代谢多样性与活性。

　　指标：

　　平均颜色变化率(AWCD)

　　Shannon 多样性指数

　　碳源利用模式

　　适用：比较不同处理下微生物功能差异。

　　6. ATP 含量测定

　　原理：ATP 是活细胞能量载体，其含量与活微生物数量高度相关。

　　方法：荧光素-荧光素酶反应，通过发光强度定量 ATP。

　　优点：快速(几分钟出结果)、灵敏。

　　局限：ATP 易降解，需立即冷冻样品。

来源：网络